Neural-27 Supplement (Minus Vitamin A)

Neural-27添加剂 (去除维生素A) 是一种优化的无血清添加剂，基于原始的B-27，去除了维生素A（视黄醇乙酸酯）。维生素A能被转化为视黄酸，而视黄酸可以诱导神经干细胞的分化。不含维生素A的Neural-27与合适的基础培养基结合后，适用于多能干细胞 （PSC）衍生的神经祖细胞扩展，以及原代神经干细胞和神经祖细胞的生长和活性维持，可培养悬浮的神经球，不会诱导其分化。 使用说明 一、神经干细胞培养基的制备（以500mL为例） 1、于4℃过夜解冻本产品。 【注】如果不立即使用，请分装并保存在-20℃，避免反复冻融。 2、无菌条件下添加10mL Neural-27 添加剂 (去除维生素A) 到485mL的DMEM/F-12（Aladdin货号 D778392）中。 【注】如果不立即使用，请在2~8℃下保存，一个月有效。 3、使用前请补充以下成分到培养基中： (1)、加入5ml L-谷氨酰胺，终浓度为2 mM； (2)、加入10 μg rhEGF，终浓度为20 ng/mL； (3)、加入5 μg rh-bFGF，终浓度为10 ng/mL； (4)、加入终浓度为2μg/mL的肝素钠。 【注】NSC完全培养基在2~8℃下可保存1周，请不要冻融培养基。 二、神经干细胞和祖细胞的神经球培养（仅供参考） 1、接种原代小鼠中枢神经系统（CNS）细胞 (1)、将CNS来源的细胞置于10mL NSC完全培养基中，细胞密度如下： • 胚胎CNS来源的细胞：8×10⁴ cells/cm² • 成年CNS来源细胞：2×10⁴ cells/cm² (2)、置于37℃，5% CO₂的恒湿培养箱中培养。 2. 神经干细胞球传代培养 (1)、当神经球直径达到100~150 μm时（通常原代接种后5~8天达到），应传代。请不要让神经球长得太大（直径>200µm），大的神经球核心的细胞将缺乏适当的气体交换和养分而导致坏死。 (2)、收集所有细胞悬液到一个15mL或50mL离心管中。 (3)、将细胞悬液经90~140g离心5分钟后，去除上清液。 (4)、向细胞沉淀物中加入1mL NSC完全培养基重悬，并用移液枪吹打20-30次，直到制成单细胞悬液（用力吹打，但不要将气泡引入悬液中）。 (5)、加入足量NSC完全培养基，重新接种细胞，调整密度如下： • 胚胎CNS来源的细胞：2×10⁴ cells/cm² • 成年CNS来源细胞：4×10³ cells/cm² (6)、置于37℃，5% CO₂的恒湿培养箱中培养。 产品优势： 1、去除维生素A以支持神经干细胞扩增以及特定的分化流程。 2、提高神经干细胞增殖速度，提高存活率。 3、维持神经干细胞表型和分化特性。 4、无血清培养系统，优化配方。 5、注射用水配制，符合cGMP规定生产，工艺稳定，批差异小。 6、原料均选用自产或者经过严格检测和纯化的低内毒素高纯药用级别原料。 7、严格的质量检测程序，远高于同行业要求指标，产品性能突出，指标优于进口。 8、进口材质无菌包装瓶，符合cGMP管理规定，优秀的密闭性及内部涂层保护，极大的保证了产品的稳定性。 注意事项： 1、本产品不含维生素A，如有其他实验需求可自行添加。 2、本产品为无菌包装，请注意无菌取用。 3、为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

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