阿拉丁生产的 FnCas12a (Cpf1),也称为 Cpf1,是本公司自主研发的技术平台表达、纯化获得的一种由 RNA 引导的可编辑 DNA 的重组核酸内切 酶,具有基因编辑效率高,脱靶效率低的优点。FnCas12a 来源于 Francisella novicida U112, 分子量大约为 154kDa。FnCas12a 识别含有 TTN 的 PAM 序列,并且 FnCas12a 的切割位点相对远离其识别位点为多次编辑提供了可能性,这些特点使 Cas12a 与 Cas9 可以互为补充。只需简单将 guide RNA (gRNA)与 Cas12a 蛋白相结合,由于该 gRNA 仅含有 crRNA,无需 trans-activating crRNA (tracrRNA)即可实现基因编辑的目的。 FnCas12a 包含约 1300 个氨基酸,含有 RuvC-like 结构域,同时具有 DNA 和 RNA 内切酶的活性。研究表明,FnCas12a 与 Cas9 由于两者结构的 不同导致了其分子机制有所差异。CRISPR-Cas12a 系统是由 Cas12a 和 gRNA (crRNA,仅需约 40-44 个碱基)组成。FnCas12a 由 gRNA 引导 至互补链,识别互补链上 5'端短的富含 T 碱基(5'-TTN-3')的 PAM (Protospacer adjacent motif)序列,然后 FnCas12a 中的 RuvC 核酸内切酶结构 域逐个切割互补链和靶链,以产生交错的 DNA 双链断裂,断裂发生在 PAM 序列 3'端的约第 18 个碱基处,切割产物为 5'端突出 4 或 5 个碱基的粘 性末端。而 CRISPR-Cas9 系统是由 Cas9 和 gRNA (crRNA 和 tracrRNA 两个 RNA 分子融合而成)组成,Cas9 在 gRNA 的引导下,识别 3'端富含 G 碱基(5'-NGG-3')的 PAM 序列,并且 Cas9 需要使用 HNH 和 RuvC 两个核酸酶结构域协同切割 DNA,断裂通常发生在 PAM 序列 5'端的第 3 个碱基 处,最终产生平末端。 纯度(Purity): 不含 DNA 内切酶和外切酶,不含 RNA 酶。 失活或抑制(Inactivation or inhibition): 65℃加热 10 分钟失活。 组分和说明 F746075
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FnCas12a (Cpf1)
CAS number:unknown molecular formula:
overview
compound introduction
Specs
| Chinese alias | - | ||
| English alias | cas12a | Cpf1 | ||
| CAS number | unknown | molecular formula | |
| molecular weight | - | Exact mass | 无动物源 |
| PSA | - | logp | - |
numbering system
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physicochemical properties
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