本公司生产的 T4 UvsX 重组酶 T4 UvsX Recombinase(2 μg/μL),也称 T4 UvsX 重组酶,是通过大肠杆菌表达、纯化获得的一种来源于 T4 噬菌体的重组酶。T4 UvsX Recombinase 属于 E.coli RecA 重组酶家族,它非特异地与单链 DNA (ssDNA)结合并在其上进行聚合化而形成螺旋状细丝(helical filaments),后者可结合于双链 DNA (dsDNA)并起始链置换反应。由于在 T4 噬菌体感染后期重组复合体启动噬菌体进行 DNA 复制,因此UvsX 也与重组依赖的 DNA 修复途径有关。T4 UvsX Recombinase 可用于重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)。RPA 技术不需要对模板进行热变性预处理,可以在恒定的温度下(37-42ºC)进行,扩增时间也较短,相较于其他的 PCR 技术具有灵敏、快速和特异的优点。RPA 技术可用于开发多种 DNA 和 RNA 病原体的检测方案,包括 MERS (中东呼吸综合征)、HIV-11、埃博拉病毒以及 COVID-19,检测下限通常低于 100 个拷贝。越来越多的证据表明,RPA 技术可以作为开发新的诊断工具的一种潜在方法,具有及时、准确、具体的特点。RPA 反应需要以下组分:重组酶 T4 UvsX Recombinase ,重组酶载入因子 T4 UvsY Protein,ssDNA 结合蛋白 T4 gp32 Protein,以及 DNA 聚合酶(如 Bsu DNA Polymerase, Large Fragment) 等。引物与模板的结合不需要通过退火来实现,而是在 UvsY 和 ATP 的帮助下,UvsX 与引物结合形成一种核酸蛋白复合物,在 dsDNA 中寻找同源序列。一旦被定位到同源序列,核酸蛋白复合物就会侵入 dsDNA,形成 D 环结构,启动链交换反应,未被结合的链则被 gp32 稳定,防止引物解离。接下来,DNA 聚合酶从引物的 3'端延伸出一条互补链,完成双链的复制,整个过程循环进行。RPA 反应除了以上核心蛋白还需要 ATP、肌酸激酶(Creatine Kinase)以及磷酸肌酸(Phosphocreatine)等作为能量提供系统。肌酸激酶的作用是 ATP再生,它可以将磷酸肌酸和 ADP 转化为肌酸和 ATP。 组分和说明 rp216600
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T4 UvsX 重组酶
CAS number:unknown molecular formula:
overview
compound introduction
Specs
| Chinese alias | T4 UvsX蛋白 | UvsX蛋白类似物 | RecA样重组蛋白 | ||
| English alias | T4 UvsX protein | UvsX protein analogue | RecA-like recombination protein | uvsX | ||
| CAS number | unknown | molecular formula | |
| molecular weight | - | Exact mass | 无动物源 |
| PSA | - | logp | - |
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