Saturated Oil Red O Staining Solution

脂质 (Lipid) 是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，不溶于水而溶于有机溶剂。人体的脂质主要有两种：一是储存脂质，如中性脂肪 (即甘油三酯)，主要分布于皮下、肾、 胰腺等部位；二是结构脂质，如类脂 (磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。脂滴是细胞内中性脂肪的主要贮存场所，在正常情况下，除脂肪细胞之外，其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴，如果细胞质内出现大量脂滴即指示为脂肪变性，常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。 油红O是一种脂溶性偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，能特异性地使组织和细胞内的中性甘油三脂、类脂、脂蛋白等染色，效果要优于传统的苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、 苏丹黑B等。当用油红O染色时，油红O在组织细胞内脂质的溶解度比在原溶剂中的溶解度更大，所以油红O就从有机溶剂转移入脂质而使之染色。 饱和油红O染色液 (Saturated Oil Red O Staining Solution) 可以通过显示细胞内的脂滴来反应组织器官的脂肪变性和类脂的异常沉着；也可以鉴别脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。本产品既可以用于组织染色又可以用于分析细胞样品中脂质状况。根据脂质的浓度不同，脂质阳性染色结果可呈橘黄至红色。本产品选用优质的进口原料，染色清晰而稳定，操作便捷。20 mL饱和油红O染色液可以配置成大约33 mL的工作液，100 mL饱和油红O染色液可以配置成大约166 mL的工作液。 使用说明： （一）工作液的配制 按照饱和油红O染色液：蒸馏水= 3:2的比例配成油红O工作液，混匀，室温放置 5-10min，过滤后使用。【油红O染色工作液不稳定，不宜提前配制】 （二）染色程序 1、冰冻切片： 1.1 制作好的冰冻切片不固定或用10%中性福尔马林固定10min，蒸馏水充分洗涤。 1.2 60%异丙醇浸洗20-30s。 1.3 油红O染色工作液染色10-15min。【可根据染色结果和要求调整时间】 1.4 60%异丙醇分化至间质清晰，蒸馏水中稍微清洗。 1.5 Mayer苏木素染色液复染核1-5min。【可根据染色结果和要求调整时间】 1.6 (可选) 1%盐酸溶液稍微分化一下。 1.7 (可选) 自来水漂洗10min或稀碳酸锂溶液中促蓝。 1.8 蒸馏水中稍微清洗。 1.9 用滤纸吸干周围水分，甘油明胶封片并在显微镜下观察。 2、培养细胞： 2.1 移除细胞培养基，PBS洗两次，加10%中性福尔马林固定液固定20-30min。 2.2 弃去固定液，用蒸馏水洗2次。 2.3 60%异丙醇浸洗5min。 2.4 弃去 60%异丙醇后加入油红O染色工作液，覆盖住底板即可，浸染10-20min。【可根据染色结果和要求调整时间】 2.5 弃去染色液，蒸馏水洗2-5次，直到无多余染液。 2.6 Mayer苏木素染色液复染核1-2min。【可根据染色结果和要求调整时间】弃去染液后水洗2-5次。 2.7 1%盐酸溶液分化1min，弃去。 2.8 加入蒸馏水覆盖细胞并在显微镜下观察。 3、细胞涂片： 3.1 制备新鲜骨髓、血液涂片，置于10%中性福尔马林固定10-15min。 3.2 取出涂片，放于流通的空气中10-15min。 3.3 放入油红O染色工作液浸染15min。【可根据染色结果和要求调整时间】 3.4 60%异丙醇分化20-30s，流水冲洗，蒸馏水稍微清洗。 3.5 Mayer苏木素染色液复染核1-2min。【可根据染色结果和要求调整时间】 3.6 1%盐酸溶液分化1min，蒸馏水稍微清洗。 3.7 用滤纸吸干周围水分，甘油明胶封片并在显微镜下观察。 （三）染色结果 中性脂肪

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