pCMV-3X Flag-p53

pCMV-3X Flag-p53是阿拉丁自行研发生产的在哺乳动物细胞中表达3X Flag标签的人源p53(1-393aa)融合蛋白的质粒，可以方便使用抗Flag标签的抗体来识别p53蛋白的表达，或进行免疫共沉淀(Co-IP)分析等。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；带有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性，可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌，而在转染哺乳动物细胞后，可使用G418 筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。G418和新霉素效果一致，但G418的细胞毒性更低。p53中文名为细胞肿瘤抗原p53 (Cellular tumor antigen p53)，是调控细胞周期的重要转录因子，主要功能包括调节细胞周期、促进细胞凋亡、维持基因组稳定性和抑制肿瘤血管生成等，野生型的p53是一个重要的抑癌基因，在抑制癌症发生过程中扮演重要的角色，因此被称为“基因组的守护者”。p53全长393氨基酸，理论分子量为43.7kDa，1979年因其在SDS-PAGE凝胶电泳中展示的分子量约为53kDa而得名p53，这种分子量的差异源自于p53存在大量的脯氨酸残基，减缓了其在SDS-PAGE凝胶电泳中的迁移速度1-2]。pCMV-3X Flag-p53质粒的主要信息如下：pCMV-3X Flag-p53质粒(6678bp)的图谱如下：pCMV-3X Flag-p53质粒的详细图谱见说明书：https://www.aladdin-e.com/Manual/D3031 pCMV-3X Flag-p53.pdf。pCMV-3X Flag-p53中没有的酶切位点包括：pCMV-3X Flag-p53中的单酶切位点包括：pCMV-3X Flag-p53质粒中推荐使用的测序引物序列如下：CMV-F primer (769-789): 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3'BGH-R primer (2285-2268): 5'-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3'pCMV-3X Flag-p53的全序列信息:D3031 pCMV-3X Flag-p53-全序列.txt。在HEK293T细胞(人胚肾细胞)中共转pCMV-3X Flag-p53和pCMV-Myc-LTA ，经免疫共沉淀(Co-IP)实验验证，p53和LTA两种蛋白可以相互作用，具体参考Flag&Myc Co-IP阳性对照质粒对。 注意事项 ： 本质粒未经阿拉丁书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。本质粒仅经过测序、免疫沉淀和免疫共沉淀验证，未经过功能性验证。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明 ： 1.首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。 2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.25µg/µl，共400µl。可以直接用于转染细胞。 参考文献： 1.Levine AJ. Cell. 1997. 88(3):323-331. 2.Vogelstein B, Lane D, Levine AJ. Nature. 2000. 408(6810):307-310.

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