样品还原剂 (10X)

阿拉丁生产的UltraBio™ Sample Reducing Agent (10X)，即UltraBio™样品还原剂(10X)，可以非常有效地打开蛋白样品中的二硫键，使蛋白质处于还原状态，适用于Tris-Glycine、Bis-Tris等系统的聚丙烯酰胺凝胶的还原性蛋白电泳。本产品与阿拉丁UltraBio™ LDS Sample Buffer (4X) 一起使用，用于常规的变性还原性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样。另外，在用于中性pH值的PAGE凝胶电泳时，建议在内槽(上槽)电泳液中加入适量阿拉丁UltraBio™ Antioxidant (400X) ，以确保还原性蛋白质在电泳或转膜过程中的还原环境，保护二硫键和敏感氨基酸(如甲硫氨酸和色氨酸)不被氧化，防止条带扩散、分辨率降低。 注意事项 ： 在低温保存环境下，本产品可能会有晶体析出，属于正常情况，可室温溶解并混匀后使用；再次溶解时可能仍有部分晶体不易溶解，由于还原剂本身是过量的，即使有少量不溶解也不影响还原效果。首次使用时可以适当分装，以便于后续使用。不推荐将还原性蛋白样品和非还原性蛋白样品一起进行电泳，如需一起进行电泳，要将两种蛋白加样孔隔开，防止还原性蛋白样品影响非还原性蛋白样品，且内槽(上槽)电泳液中不可加入 Antioxidant (400X) 。本产品有轻微毒性，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明 ： 1.将本产品从-20℃取出后室温融化或4℃取出后直接使用。2.根据实验需求按照下表配制上样体系。 Reagent Reduced Sample Sample xμl LDSSample Buffer(4X) 2.5μl Sample Reducing Agent (10X) 1μl ddH2O (6.5-x)μl Total Volume 10μl 3.将上样体系混匀后，70℃加热10分钟。注意：如果起始时细胞或组织的用量较大，基因组DNA含量较高，加热10分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再加热5-10分钟或者加入适量稀释成1X的 LDS Sample Buffer后再加热3-5分钟。充分变性后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放，同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失，这样就不会影响后续的上样操作了。4.冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。详细的Western操作可以参考阿拉丁相关网页：http://www.aladdin-e.com/support/western.htm。

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