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重组肠激酶冻干粉(牛)

CAS number:unknown    molecular formula:

overview

compound introduction

肠激酶(Enterokinase,EK)是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽。具有高度专一性,水解效率高的特点。可在较宽的pH范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。可除去位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。冀百康重组肠激酶冻干粉采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术,经层析纯化、超滤、冷冻干燥制成的冻干粉。本品氨基酸序列来源于牛肠激酶序列,含有6个组氨酸标签(含6xHis-tag),不含其他蛋白酶。 产品优势 1、无动物源性:重组表达制备,无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染,安全性高。 2、生产规模1000L以上,批间质量稳定。 3、合规性:生产设备和生产环境符合相关法规要求,符合GMP指导原则。 4、质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。 产品特性 外观:类白色粉末 蛋白含量: ≥20.0% 电泳纯度:单一主条带 推荐使用方法 1、25℃酶切条件为:25mM Tris-HCl pH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/mL(蛋白总量 50-100μg),重组EK 0.1~0.2U,酶切 16~24 小时,用 SDS-PAGE 检测酶切效果。 2、4℃酶切条件为:可在 4℃对底物进行有效低温酶切,但需要将酶切时间延长至 48~64 小时,或增加 2-3倍酶量。低温酶切有时候可获得比 25℃更好的酶切效果。 3、 在>200mM 咪唑,或>200mM NaCl,或>5%甘油,酶切效果会受影响。 可参照以下推荐方法进行酶切: 1) 为获得理想酶切结果,请将样品透析或超滤换液到 25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中,再进行酶切; 2) 若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在 100mM 以下,NaCl 浓度在 50mM 以下,甘油浓度 5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即 1U 酶切 500μg 蛋白); 3) 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好酶切效果。 4、可对酶切条件进行优化,例如缓冲液 pH,融合蛋白浓度,EK 的量,以及酶切时间,融合蛋白能在稳定条件下被酶切,用 SDS-PAGE 检测酶切效果。 5、去除重组肠激酶的办法:可使用金属螯合亲和色谱去除重组肠激酶。 注意:不建议 37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。 运输和储存稳定性 1、 运输稳定性:冰袋运输,活性稳定。 2、储存稳定性:干粉存于-15℃以下,24 个月稳定。配置溶解后分装储存于-15℃以下,反复冻融 3 次稳定;溶解后 2~8℃可保存 3 天。 3、本品仅供研究使用,不得用于动物或人类的诊断或治疗。

Specs

Chinese alias-
English aliasEnterokinase | EK | Enteropeptidase
CAS numberunknownmolecular formula
molecular weight-Exact mass无动物源
PSA-logp-

numbering system

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physicochemical properties

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Production methods and uses

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