随机突变是阐述蛋白质结构和功能之间的关系、改进蛋白质性能的重要工具。随机突变试剂盒基于易错PCR(error-prone PCR)技术,利用 Taq DNA polymerase 不具有 3′→5′校对功能的特性,在特定的反应缓冲体系中,向扩增的目的基因中引入随机突变密码子。带有随机突变的扩增产物通过双酶切,连接到表达载体中构建文库,然后转化入表达宿主中,进行蛋白活性筛选。如果经一次突变反应不能获得满意的结果,可采用连续易错 PCR(sequential error-prone PCR)策略,即将一次 PCR 扩增得到的有用突变基因作为下一次 PCR 扩增的模板,连续反复地进行随机诱变,使每一次获得的突变累积而产生更有意义的突变。本试剂盒包含有优化的 2x Random System、 Enhancer 和Sterile Water 三种组分,使用时只需加入适量的 DNA 模板和合成的两条扩增引物,并用水补足体积,即可进行扩增反应,操作简便快速,大大减少了多次加样可能造成的出错和污染机会。2x Random System 含有优化浓度的 Taq DNA polymerase、dNTPs、反应缓冲液和稳定剂,可最大限度地克服常规易错 PCR 技术中,由于 Taq DNA polymerase 本身的偏爱性造成的以 GC 突变为主的缺点,获得相对均衡的突变谱。碱基突变率可通过适量添加 Enhancer、调整模板 DNA 量和改变 PCR 扩增循环数进行控制。 产品组分表 R1372033
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Random Mutagenesis Kit
CAS number:unknown molecular formula:
overview
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Specs
| Chinese alias | - | ||
| English alias | Random Mutation Kit | ||
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| molecular weight | - | Exact mass | BioReagent |
| PSA | - | logp | - |
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