pCMV-3X Flag-LTA

质粒pCMV-3X Flag-LTA

pCMV-3X Flag-LTA

P748880-1μg

1μg

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超低温冰袋运输

-20℃保存。

pCMV-3X Flag-LTA是阿拉丁自行研发生产的用于在哺乳动物细胞中表达带有3X Flag标签的LTA (large T antigen) (1-708aa)融合蛋白的质粒，可以方便地使用抗Flag标签的抗体来识别LTA蛋白的表达，或进行免疫共沉淀分析等。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；带有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性，可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌。而在转染哺乳动物细胞后，可使用G418 筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。G418和新霉素效果一致，但G418的细胞毒性更低。LTA即SV40大T抗原(SV40 large T antigen)，也称SV40gp6 large T antigen (Macaca mulatta polyomavirus 1)，由猿猴病毒40 (Simian virus 40, SV40)表达，全长708氨基酸，分子量为81.6kDa，是一种六聚体蛋白。当LTA单独表达时能诱导静止细胞的增殖和转化，可以诱导实验动物肿瘤的形成，为研究DNA复制和细胞转化提供了非常有用的模型1-3]。pCMV-3X Flag-LTA质粒的主要信息如下：pCMV-3X Flag-LTA质粒(7608bp)的图谱如下：pCMV-3X Flag-LTA质粒的详细图谱见说明书：https://www.aladdin-e.com/Manual/D3032 pCMV-3X Flag-LTA.pdf。pCMV-3X Flag-LTA中没有的酶切位点包括：pCMV-3X Flag-LTA中的单酶切位点包括：pCMV-3X Flag-LTA质粒中推荐使用的测序引物序列如下：CMV-F primer (769-789): 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3'BGH-R primer (3198-3215): 5'-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3'pCMV-3X Flag-LTA的全序列信息:D3032 pCMV-3X Flag-LTA-全序列.txt。在HEK293T细胞(人胚肾细胞)中共转pCMV-3X Flag-LTA和pCMV-HA-p53 ，经免疫共沉淀(Co-IP)实验验证，p53和LTA两种蛋白可以相互作用，具体参考Flag&HA Co-IP阳性对照质粒对。 注意事项 ： 本质粒未经阿拉丁书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。本质粒仅经过测序、免疫沉淀和免疫共沉淀验证，未经过功能性验证。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明 ： 1.首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。 2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.25µg/µl，共400µl。可以直接用于转染细胞。 参考文献： 1.Ahuja D, Sáenz-Robles MT, Pipas JM. Oncogene. 2005. 24(52):7729-7745. 2.Xiao CY, Jans P, Jans DA. FEBS Lett. 1998. 440(3):297-301. 3.Xiao CY, Jans DA. FEBS Lett. 1998. 436(3):313-317.