无蛋白非程序细胞冻存液（干细胞专用）

无血清干细胞专用冻存液

Serum-free Cell Cryopreservation Medium

Serum/Protein-Free Cell Freezing Medium

P778221-20ml

20ml

无菌过滤

2-8°C储存

冰袋运输

Store at 2-8℃ long term (12 months).

无血清细胞冻存液 (干细胞专用) 采用渗透性保护剂、非渗透性保护剂、细胞沉降稳定剂、细胞膜保护剂组合的方案对细胞进行全方位低温保护，可使冻存过程中溶液冰点降低， 提高细胞膜对水的通透性，使细胞内水分在冻结前透出细胞，防止或减少冰晶对细胞的损伤， 同时降低冰冻时细胞周围电解质浓度，避免电解质损伤，还可以延缓冻存过程中细胞的互相挤压，保护细胞膜，从而有效提高细胞复苏率和活力。 传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合，因其中的血清成分复杂、批次差异大等缺点，其应用具有局限性，且需要采用程序性降温的冻存方法，费时费力。无血清细胞冻存液 (干细胞专用) 是一款Serum-Free、Animal Origin-Free、Protein-Free、Chemically Defined，不需要程序性降温的冻存液。与传统细胞冻存液相比具有明显优势，冻存细胞复苏后的存活率也有明显提高。 无血清细胞冻存液 (干细胞专用) 推荐用于各种常规哺乳动物细胞的冻存，尤其适合于无血清培养的干细胞、蛋白表达细胞的冻存。 产品优势： 1、无血清，无动物源成分，无蛋白，化学成分明确。 2、有效提高细胞复苏存活率，大部分细胞（包括间充质干细胞）复苏率可达90%以上。 3、不影响干细胞表型和生长状态，且可维持干细胞的多分化性。 4、即用型产品，且无需程序性降温，可直接-80℃过夜后转移至液氮中长期保存。 5、严格的质量控制，产品性能媲美进口；原料均选用自产或者经过严格检测和纯化的低内毒素高纯药用级别原料；注射用水配制，工艺稳定，批差异小。 6、已有干细胞、免疫细胞、肿瘤和转化细胞系等多种细胞的冻存应用。 使用说明： 一、细胞冻存 【冻存前，请确保细胞处于对数生长期】 1、贴壁细胞制备细胞悬液：（悬浮细胞请忽略此步骤） (1) 将旧培养基吸除，用PBS清洗两遍。 (2) 在培养瓶中加入少许胰酶，以能覆满瓶底为限。将培养瓶平置于培养箱中消化约1~2分钟，期间在显微镜下观察，一旦发现细胞间隙增大、细胞变圆、比较松动后，立即终止消化（个别难消化细胞需要延长消化时间，但要避免消化过度）。 (3) 加入适量温浴好的完全培养基终止消化，轻轻吹打均匀细胞。 2、贴壁细胞和悬浮细胞的冻存： (1) 取少量细胞悬液细胞计数，算出细胞总数和所需细胞冻存液的量。细胞的冻存密度以1×10⁶~2×10⁷ cells/ml为宜。 (2) 将所需量的细胞悬液转移至适当离心管中，200~500×g，离心3-5分钟，弃上清收集细胞。（离心速度和时间取决于细胞类型） (3) 向细胞沉淀中加入适量 无血清细胞冻存液 (干细胞专用)，轻轻吹打以重悬细胞，分装于无菌细胞冻存管中，严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。 (4) 直接置于-80℃冰箱中储存，细胞可至少保存一年；或者-80℃过夜后，次日将细胞投入液氮中长期储存。 二、细胞复苏 1、自液氮罐或-80℃冰箱中取出冻存管，检查盖子是否旋紧，立即放入37℃水浴中快速解冻（避免冰晶重新结晶而造成细胞死亡），轻摇冷冻管使其在1~2分钟内全部融化，以75% 酒精擦拭冻存管外部，移入无菌操作台内。 2、将解冻的细胞悬液移至15ml无菌离心管中，再加入5~10ml预热好的完全培养基，轻轻混合均匀，200~500×g，离心3-5分钟，弃上清收集细胞。（离心速度和时间取决于细胞类型） 3、加入预热好的完全培养基，混合均匀，转移到细胞培养皿或培养瓶中，置于细胞培养箱中培养。 注意事项： 1、冻存过程中，在将冻存液加入到细胞之后，请尽量在冰袋附近操作，因为低温可以避免保护剂对细胞造成损伤。 2、请保证细胞冻存管完全密封，避免在复苏过程中冻存管炸裂。 3、理论上，本产品适用于各种哺乳动物细胞的冻存 ，但因细胞系种类繁多，无法逐一验证，因此我们推荐您在第一次使用本产品之前，实现对所冻存的细胞进行至少为期1周的试验性细胞冷冻保存培养，确认性能后再进行正式冻存。 4、本产品为无菌包装，无需过滤，请注意无菌取用。 5、为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。