随机突变试剂盒

试剂盒

Random Mutation Kit

Random Mutagenesis Kit

R1372033-20T

20T

BioReagent

-20°C储存,避免反复冻融

超低温冰袋运输

Store at 2-8℃ short term (3 months). Store at -20℃ long term (12 months). Avoid freeze/thaw cycle.

随机突变是阐述蛋白质结构和功能之间的关系、改进蛋白质性能的重要工具。随机突变试剂盒基于易错PCR（error-prone PCR）技术，利用 Taq DNA polymerase 不具有 3′→5′校对功能的特性，在特定的反应缓冲体系中，向扩增的目的基因中引入随机突变密码子。带有随机突变的扩增产物通过双酶切，连接到表达载体中构建文库，然后转化入表达宿主中，进行蛋白活性筛选。如果经一次突变反应不能获得满意的结果，可采用连续易错 PCR（sequential error-prone PCR）策略，即将一次 PCR 扩增得到的有用突变基因作为下一次 PCR 扩增的模板，连续反复地进行随机诱变，使每一次获得的突变累积而产生更有意义的突变。本试剂盒包含有优化的 2x Random System、 Enhancer 和Sterile Water 三种组分，使用时只需加入适量的 DNA 模板和合成的两条扩增引物，并用水补足体积，即可进行扩增反应，操作简便快速，大大减少了多次加样可能造成的出错和污染机会。2x Random System 含有优化浓度的 Taq DNA polymerase、dNTPs、反应缓冲液和稳定剂，可最大限度地克服常规易错 PCR 技术中，由于 Taq DNA polymerase 本身的偏爱性造成的以 GC 突变为主的缺点，获得相对均衡的突变谱。碱基突变率可通过适量添加 Enhancer、调整模板 DNA 量和改变 PCR 扩增循环数进行控制。 产品组分表 R1372033