蔗糖-多聚甲醛固定液 (5%)

生物试剂/缓冲液

固定液 | 组织固定液

Sucrose-PFA Fix Solution | Sucrose-PFA Solution

Sucrose-Paraformaldehyde Fix Solution (5%)

S1209545-100ml

100ml

适用于免疫荧光(IF)

5%

-20°C储存

超低温冰袋运输

-20℃储存（12个月）。

蔗糖-多聚甲醛固定液(Sucrose-Paraformaldehyde Fix Solution)，是一种含5%、10%、20%或30%浓度的蔗糖及4%多聚甲醛的固定液，pH为7.4。本产品适用于免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)和流式分析(Flow Cytometry)等组织、细胞等生物样品的固定和脱水，也可作为特殊样本的脱水剂和冷冻保护剂。使用蔗糖-多聚甲醛溶液进行梯度脱水，可以有效防止冰冻切片时样本内产生冰晶而影响后续的切片和检测。 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固，阻止内源性或外源性酶反应，防止组织或细胞自溶或异溶，以保持其原有结构和形态，避免抗原失活或弥散。多聚甲醛中的甲醛可以与蛋白质的氨基端发生反应，使蛋白质相互交联而促进抗原交联网络系统的搭建与形成，使抗原固定于原位，蛋白质发生凝固，水溶性降低，故而能够较好地保持细胞和抗原的完整性；蔗糖具有脱水作用，常用作脱水剂和冷冻保护剂。 蔗糖-多聚甲醛固定液主要由5%、10%、20%或30%浓度的蔗糖及4%多聚甲醛、去离子水组成，样品可以直接使用5%、10%、20%和30%蔗糖-多聚甲醛固定液依次进行固定和脱水。也可使用免疫染色固定液进行固定后，依次使用5%、10%、20%和30%蔗糖-PBS溶液进行脱水(后者适用于对于多聚甲醛浸泡时间过长易损坏的一些比较特殊的组织样品）。 本产品为即用型，使用便捷，无须配制或稀释。 操作步骤： 1.新鲜组织取材或经灌注组织取材，先置于5-20倍体积的5%蔗糖-多聚甲醛固定液中，4ºC固定2-24h (视组织块大小而定)，通常不超过8h，当组织块完全沉底时，可取出依次置换下一浓度梯度固定液，即10%蔗糖-多聚甲醛固定液、20%蔗糖-多聚甲醛固定液和30%蔗糖-多聚甲醛固定液，每个浓度的蔗糖-多聚甲醛通常固定不超过8h。 2.后续根据实验要求进行包埋等操作。 注意事项： 1.组织块不宜过大，较大块组织需修整成小块再固定（1.0×1.0×0.2cm）。 2.组织块放入固定液中固定，固定液体积是组织块体积的 5-20倍，以达到组织充分固定的效果，4ºC固定 2-24h，组织沉底后继续进行更换下一梯度固定液。 3.组织固定时间长短取决于组织大小、温度，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎，避免长时间固定。 4.本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响染色。 5.醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍或结构变化。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，或改变抗原决定簇的空间结构，可造成假阴性的染色结果。因此，4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。 6.免疫染色固定液含有甲醛，对人体有害，操作时需注意防护，在通风橱内操作。 7.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 8.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。