仿生基质冻干粉

基底膜基质 | 细胞3D培养仿生基质胶 | 无动物源成分仿生基质胶 | 细胞支架

Basement Membrane Matrix | ECM | Extracellular Matrix | BME | Basement Membrane Extract

Bionic Matrix Powder

b988953

无动物源

2-8°C储存

冰袋运输

2-8℃储存（730天）。

本系列细胞培养仿生基质冻干粉，是一种由生物基材料混合而成，成分限定的网络支架体系。与其他动物组织提取物以及基于交联产生的水凝胶相比，具有完全的生物相容性，且不含任何可能会干扰或造成污染的动物源组分及对细胞有毒的交联剂等成分，所包含组分可在细胞培养体系及动物组织中通过自组装形成网络结构，并且可共价嵌入RGD等细胞粘附序列，在材料属性、微观结构、物理性质及功能上高度模拟天然细胞外基质(ECM)，从而在体外创建与组织内细胞生长类似的微环境。 本产品可于室温或生理条件下，基于样品浓度在液态或凝胶态进行培养细胞的3D支撑，真正做到单一静态条件下实现生物体外的细胞三维培养。相比于市面上同类型产品，本产品具有可冷冻或冷藏保存、室温条件下开盖即用的特质，细胞接种前无需进行繁琐的工作配制，使用过程简单、快速。细胞的收获通过稀释后低速离心即可轻松实现。 功能与优点： Ø 冻干粉末状态，可冷藏或冷冻保存，常温操作即开即用，无动物源及细胞功能成分； Ø 兼容性强，在任何细胞培养基中溶解即可使用，并不改变培养体系的pH等环境条件，也便于使用者根据需求进行酚红、生长因子等成分的添加； Ø 具备超强的细胞支撑功能，在较低浓度为液态时即可实现对细胞球和类器官的有效支撑，细胞混合即可接种，稀释后离心回收，非常便于生物反应器中的搅拌等操作； Ø 溶解后保持均匀透明的状态，支持细胞成像分析； Ø 包含成胶速度不同、物理性质各异的系列产品，并提供成熟的技术解决方案便于客户操作，以满足3D细胞液态培养、3D细胞凝胶态培养及动物注射等不同应用场景。 使用说明及技术方案： Ø [B988953-01] 仿生基质冻干粉，Ⅱ 型 II型仿生支架在pbs缓冲液及绝大部分细胞培养基溶液中可自发形成多孔网络支架，而在去离子水中自组装能力较弱；产品自组装形成的支架结构被破坏后可迅速自修复，具有超强的细胞支撑功能，在低浓度溶液状态及高浓度水凝胶状态皆可对细胞进行3D立体支撑；细胞的回收稀释后离心或过滤即可回收细胞。 当使用浓度低于5mg/ml左右时，为流动性较低的半凝胶状态；5mg-7mg/ml左右时，为可溶胀的水凝胶状态；而高于7mg/ml时，可以在TC等离子表面处理的容器表面形成稳定不发生溶胀的水凝胶层，从而可以实现胶上换液等操作；II型仿生支架可对细胞形成有效支撑，而构成支架网络的疏密及基质的机械应力对细胞增殖及分化的影响各异，研究者须进行探索。 适于细胞球及类器官培养、药物筛选等应用。 用途一：3D细胞液态/可溶胀的水凝胶培养（适用于液态培养体系中的细胞或类器官的大规模增殖及储存等；推荐使用支架功能成分3～6mg/ml） 1. 取一个西林瓶包装，根据所需支架浓度加入5 ml左右的完全培养基，用移液器轻轻吹打，直至将冻干粉充分分散，然后将混合溶液转移至无菌离心管，涡旋30-60秒至完全溶解，4000转离心5分钟以除去所产生气泡；该溶液可用于短期保存或直接应用； 2. 按常规细胞培养方法沉淀收集待培养细胞后，使用步骤1中支架溶液，重悬细胞，并调整到所需细胞密度； 3. 将所得细胞/支架混合悬液接种到无TC处理的细胞培养板、培养瓶或生物反应器内。静态培养时，类器官培养初始***使用浓度为3 mg/ml，如培养过程搅拌或震荡，或所培养细胞未形成细胞球，则可按实验需求降低支架成分的终使用浓度；而随着细胞密度及细胞球体积的增大，须增大支架浓度，建议细胞球的体积每增大50 μm，支架的浓度升高2 mg/ml； 4. 培养过程细胞换液时使用移液器直接取出培养体系置于离心管内，以缓冲液或培养基稀释10倍，充分混匀后1500转离心5分钟，弃上清后，用含有与步骤2中同样终支架材料浓度的培养液对细胞进行重新悬浮继续培养； 或按照半量换液法进行操作：取出一半体积的培养体系，加入另外一个培养孔里面，再用含有与步骤2中同样终支架材料浓度的培养液补满另外一半体积； 5. 收获细胞时，使用微量移液器直接取出培养体系置于离心管内，以缓冲液或基础培养基充分混匀稀释10倍，1500转离心5分钟，收获沉淀细胞。 用途二：非溶胀水凝胶培养（适用于水凝胶内细胞的3D培养、类器官圆顶培养等；推荐使用支架功能成分10 mg/ml） 1. 取一个西林瓶包装，加入1.5 ml的完全培养基，用移液器轻轻吹打，直至将冻干粉充分分散，然后将混合溶液转移至无菌离心管，涡旋30-60秒至完全溶解，4000转离心5分钟以除去所产生气泡；该溶液可用于短期保存或直接应用； 2. 按常规细胞培养方法沉淀收集待培养细胞后，加入一定量的步骤1中混合凝胶并小心混合（避免产生气泡）重悬细胞，调整到所需细胞密度； 3. 将步骤2所得细胞/支架混合悬液以平铺或圆顶的形式（水凝胶或圆顶培养）接种到TC处理的细胞培养板或培养瓶内；在培养箱中正置约3小时孵育，使凝胶层稳定；推荐平铺量为200～300 μl/cm2,过高的平铺量易造成底层细胞在培养过程中缺乏营养与氧气而死亡，过低的平铺量则可能造成部分细胞因失去支撑而贴壁；圆顶培养根据需要滴加20～50μl进行胶滴制作，如果形成胶滴漂浮，延长孵育时间，使胶滴与培养孔底板结合更牢固；如果圆顶胶滴为5～10μl 的较小胶滴，且培养过程需要反复换液，稳定的过程请把闲置的培养孔加入无菌水或pbs缓冲液，稳定约3小时，以避免胶滴挥发干燥，如果必须更小的胶滴或缩短胶滴稳定时间，请把支架材料浓度提高至15 mg/ml，即每瓶加入1 ml完全培养基溶解后混合细胞点胶，正置稳定10-15 分钟即可； 4. 凝胶层或胶滴稳定后正置培养容器，在凝胶的上层加入一定量的细胞培养基，换液时小心取出胶上的溶液加入新鲜的培养基进行置换即可，为保持凝胶层的稳定而不被冲散，建议每次置换一半体积的胶上培养基； 5. 收获细胞时，使用微量移液器直接取出凝胶置于离心管内，以缓冲液或基础培养基充分混匀稀释10倍，1500转离心5分钟，收获沉淀细胞。 Ø [B988953-02] 仿生基质冻干粉，Ⅲ 型 Ⅲ型仿生支架在溶液中如遇到动物组织（包括血清）及培养基中普遍存在的某些成分会经触发形成多孔网络支架；进入细胞培养体系及动物组织之前为液态，进入之后高浓度多肽溶液可迅速触发形成水凝胶，可用于动物模型构建应用。 动物注射（适用于PDX与CDX等动物模型构建、细胞及药物功能成分缓释载体等）操作方法： Ⅲ型所形成凝胶具有剪切稀化特性，形成水凝胶后仍然可以经注射器吸取，并与细胞等混合注射，而注射后可迅速恢复为凝胶状态。 1. 取一个西林瓶包装，根据实验目的加入2 ml的完全培养基或pbs缓冲液， 用移液器轻轻吹打，直至将冻干粉充分分散，然后将混合溶液转移至无菌离心管，涡旋30-60秒至冻干粉完全溶解，4000转离心5分钟以除去所产生气泡；该溶液可用于短期保存或直接应用； 2. 吸取步骤1中凝胶与细胞悬液1:1重悬，并缓慢的吸入注射器中，避免产生气泡； 3. 缓慢地将形成的Ⅲ混合凝胶注入动物身体部位。 Ø [B988953-03] 仿生基质冻干粉，Ⅵ型 Ⅵ型仿生支架在 pbs 缓冲液及绝大部分细胞培养基溶液中可自发形成多孔网络支架，而在去离子水中自组装能力较弱；产品自组装形成的支架结构被破坏后可迅速自修复，具有超强的细胞支撑功能，在低浓度溶液状态及高浓度水凝胶状态皆可对细胞进行 3D 立体支撑；细胞的回收稀释后离心或过滤即可回收细胞。 当Ⅵ使用浓度低于 5mg/mL左右时，为流动性较低的半凝胶状态；5mg-7mg/mL左右时，为可溶胀的水凝胶状态；而高于7mg/mL时，可以形成稳定不发生溶胀的水凝胶层，从而可以实现胶上换液等操作；Ⅵ可对细胞形成有效支撑，而构成支架网络的疏密及基质的机械应力对细胞增殖及分化的影响各异，研究者须进行探索。 适于细胞球及类器官培养、药物筛选等应用。每一西林瓶包装所含支架功能成分为15mg。 用途：作为载体，负载细胞及衍生物、药物以及相关功能成分。若需液态条件，推荐使用支架功能成分4～6mg/mL；若需凝胶态条件，推荐使用支架功能成分大于10mg/mL。