重组肠激酶冻干粉（牛）

Enterokinase | EK | Enteropeptidase

rp220145-1mg

1mg

无动物源

≥1000U/mg protein

肠激酶（Enterokinase,EK）是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。具有高度专一性，水解效率高的特点。可在较宽的pH范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。可除去位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。冀百康重组肠激酶冻干粉采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术，经层析纯化、超滤、冷冻干燥制成的冻干粉。本品氨基酸序列来源于牛肠激酶序列，含有6个组氨酸标签（含6xHis-tag），不含其他蛋白酶。 产品优势 1、无动物源性：重组表达制备，无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染，安全性高。 2、生产规模1000L以上，批间质量稳定。 3、合规性：生产设备和生产环境符合相关法规要求，符合GMP指导原则。 4、质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。 产品特性 外观：类白色粉末 蛋白含量： ≥20.0% 电泳纯度：单一主条带 推荐使用方法 1、25℃酶切条件为：25mM Tris-HCl pH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/mL（蛋白总量 50-100μg），重组EK 0.1~0.2U，酶切 16~24 小时，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。 2、4℃酶切条件为：可在 4℃对底物进行有效低温酶切，但需要将酶切时间延长至 48~64 小时，或增加 2-3倍酶量。低温酶切有时候可获得比 25℃更好的酶切效果。 3、 在＞200mM 咪唑，或＞200mM NaCl，或＞5%甘油，酶切效果会受影响。 可参照以下推荐方法进行酶切： 1） 为获得理想酶切结果，请将样品透析或超滤换液到 25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中，再进行酶切； 2） 若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在 100mM 以下，NaCl 浓度在 50mM 以下，甘油浓度 5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即 1U 酶切 500μg 蛋白）； 3） 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。 4、可对酶切条件进行优化，例如缓冲液 pH，融合蛋白浓度，EK 的量，以及酶切时间，融合蛋白能在稳定条件下被酶切，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。 5、去除重组肠激酶的办法：可使用金属螯合亲和色谱去除重组肠激酶。 注意：不建议 37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。 运输和储存稳定性 1、 运输稳定性：冰袋运输，活性稳定。 2、储存稳定性：干粉存于-15℃以下，24 个月稳定。配置溶解后分装储存于-15℃以下，反复冻融 3 次稳定；溶解后 2~8℃可保存 3 天。 3、本品仅供研究使用，不得用于动物或人类的诊断或治疗。

Responsible for initiating activation of pancreatic proteolytic proenzymes (trypsin, chymotrypsin and carboxypeptidase A). It catalyzes the conversion of trypsinogen to trypsin which in turn activates other proenzymes including chymotrypsinogen, procarboxypeptidases, and proelastases.

酶比活：≥1000 单位/毫克 蛋白质。酶活定义：在25°C，12~16小时内，将0.5mg保存于25mM Tris-HCl pH8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量为1U。

重组表达

35 kDa

No tag

35±7 kDa

毕赤酵母 Accession #: P98072 | 毕赤酵母

牛(Bovine)

Yes

Yes

≥1000 单位/毫克 蛋白质。酶活定义：在25°C，12~16小时内，将0.5mg保存于25mM Tris-HCl pH8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量为1U。